辅酶是有机非蛋白小分子，其用途为在酵素（酶）内载运化学基。许多辅酶是磷化水溶性维他命。但非维他命物质也可能是辅助，如ATP－磷酸基的生化载具。(ATP不做为辅酶？)
辅酶被消耗在其帮助的反应上，如NADH辅酶被氧化还原反应转化至NAD+。但辅酶是会再产生的，且其在细胞内的浓度会维持在一稳定的程度。 辅酶的一特殊子集为辅基。其辅因子(或称辅助因子)会紧紧黏在酵素上，且不会在反应中被消耗。辅基包含有钼蝶呤、硫辛胺和生物素。
酶蛋白与辅酶单独存在时，一般无催化能力，只有二者结合成完整的分子时，才具有活性 ，此完整的酶分子称为全酶。